第016章 完美的PCR实验
吴妍知道,周文肯定有特殊的提取手法。
不过见他不愿意说,她也没有强求,毕竟这是别人的看家本领,泄露出去有害无益。
随后两个人又谈了一下待遇问题,吴妍把之前对石磊说的话,跟周文又讲了一遍,最后笑问道:“你还有什么问题吗?”
周文想到了任务,说:“能不能问一下,我算是合同工还是正式工啊?”
“这个嘛……”吴妍迟疑了一下,她没想到周文会问这个问题。
现在生物生什么情况,她相信周文心里应该很清楚,江州市第一人民医院的合同,而且还那么优厚,别说他一个小小的本科生了,即使生物硕士生、博士生,很多人也是求之不得呢。
他居然还想一步登天,直接解决编制问题,真的有些过分了,她自己到现在还是合同工呢。
吴妍想了想说:“一般来说,如果是院里聘用的话,那肯定是正式工,但你这是检测中心PCR组的聘用合同,所以恐怕只能是合同工了。”
“合同工啊……”周文迟疑着。
其实合同工还是正式工,他真得无所谓,只要能让他到检测中心去实习实践,就算临时工他也愿意。
这不是任务要求在一个礼拜内成为正式工嘛,他不能不抻着点。
1000点经验值和1000点积分呢,还有一次开黑铁箱子的机会。
吴妍原本以为事情已经办妥了呢,没想到这里又节外生枝了,于是苦口婆心说:“你虽然是合同工,但是待遇是按照正式工来算的,并没有差在哪里。
另外嘛,什么事都是一步步来的,你先上班,编制问题等过一段时间再解决也不迟嘛。”
周文笑问道:“你是我学姐,而且也在医院上了一年班了,你说实话,我如果真签了合同工,编制大概什么时候能解决?”
“这个嘛……”吴妍有些尴尬,端起咖啡杯掩饰了一下。
等放下杯子后,吴妍说:“那这样吧,我帮你回去问问。但说实话,你不要抱太大期望。”
周文点点头,笑道:“行,那就麻烦学姐了。”
“不客气。”
周文那边还在离心呢,也没有多待,客气了几句便起身离开了。
……
回到实验室时,杨宇东和顾红云迫不及待的问他面试成功没有?
周文笑呵呵的说:“我提了个条件,她说要回去跟领导商量商量,等商量之后再给我准信。”
杨宇东无语道:“条件都那么优越了,你还要提条件啊?”
周文说:“我这不是看机会难得嘛,就想试试他们的底价。”
杨宇东:“……”
他真想用提取枪把周文脑浆抽出来一点,看他脑子里一天到晚到底在想些什么?
周文嘿嘿笑着去做PCR实验了。
PCR全称是PolymeraseChainReaction。
中文名是“聚合酶链式反应”,又称“聚酶链式反应”,是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。
能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段,于几小时内扩增至十万乃至百万倍。
其原理基本与人体细胞内DNA复制像似,但反应体系相对简单。
当然了,这不意味着PCR简单。
相反,PCR是非常难的.
首先通过高温“变性”,把一段双链结构的DNA解链,变成两条单链结构DNA。
之后“退火”,在低温下让“引物”和作为模板的DNA互补结合,形成局部双链。
最后中火“延伸”,通过DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链产生延伸反应,变成两条双链结构的DNA。
接下来不断重复这个过程。
1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……
通过PCR技术,可以从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。
比如亲子鉴定;
比如疫苗研究;
比如病毒疾病防治;
又或者遗传病研究等等,都需要大量用到PCR。
当然,周文今天做的水稻蚜虫生化试剂实验,其实是没有必要做PCR的。
蚜虫是一种很低级的虫子,一般直接用药物作用在其身上,然后看它的遗传特性就行了。
之所以还要做PCR,更多的目的也是为了学习PCR。
PCR反应体系包含了水、缓冲液、DNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)、引物P1/P2/DNA模板以及TAQ酶。
等一切都准备好之后,周文调节好提取枪的量程,然后提取30μl的水到三组PCR管里。
吸液的时候严格按照操作规程,垂直吸液、慢吸慢放。
换过枪头后,提取了5毫升的缓冲液到PCR管中。
再分别向管中加入DNTP/P1/P2/DNA模板……
得益于这段时间的学习,除了一开始有些紧张外,周文做起来有条不紊。
等所需原料添加完毕后,接下来就是离心了。
按照要求设定好转速后,等了三分钟,离心完成。
周文从离心机里取出装着混合液的PCR管,立刻放到了PCR仪上,进行扩增。
设定94℃预变性4min。
然后设定20次循环扩增阶段。
高温、低温、中温、高温……
1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……
周文焦急的等待着,心情就像产房外的丈夫一样,心里默默祈祷着“母子平安”,同时也在想,不知道等会生出来的是男是女?身体健康与否?
就在这时,周文突然想到系统积分可以加快实验进度,与其在这里傻等几个小时,要不加快看看?
反正这里也没有人看到。
想到这里,周文立刻召唤出个人属性页面,点击积分后,眼前弹出一个选项。
【请问是否消耗积分加快实验进度?是/否】
【是】。
【本次实验加快需要消耗20点积分,请再次确认】
周文见仅仅只要20点积分就能加快实验进度了,那还有什么好犹豫的,立刻选择了确认。
还不等周文反应过来,下一秒,PCR仪已经完成了扩增。
周文心里惊讶不已,系统的力量简直神秘莫测。
在心里感慨了一句,很快他又紧张了起来。
第一次做PCR,不知道能不能成功呢?
周文打开PCR仪,从里面取出PCR管。
本来下面是产物分析,不过周文有真视之眼,微微眯起眼睛,很快他便看到了高密度的双螺旋结构的DNA。
“perfect~”
要不是戴着口罩,周文就要哈哈大笑了起来。
学生物的有一个算一个,谁不是经过无数次失败后才学会做PCR的,有哪个人能像他一样,第一次做扩增,就一次性成功?
而且扩增效果出乎意料的好,简直完美。
……
江州市,第一人民医院,检测中心,PCR组。
吴妍在外面吃过午饭才回到医院,然后第一时间就到组长办公室汇报情况。
“人呢?”正在写实验报告的张曙光,头也不抬的问到。
吴妍有些不好意思的说:“那个……还没来。”
去的时候她可是拍着胸脯保证说,手到擒来的,结果牛皮吹炸了。
张曙光抬头意外道:“怎么,不愿意来?”
吴妍摇摇头说:“不是,只是他说……”
吴妍把周文的要求跟张曙光讲了一遍。
张曙光拿笔的左手,在办公桌上敲击着,面带微笑的说:“你说你,这么聪明的一个人,怎么关键时候掉链子啊?”
吴妍奇怪道:“我怎么掉链子啦?他要正式工待遇,这个我哪敢越俎代庖,替您答应啊?”
张曙光笑道:“越俎代庖怎么啦,他一个生物本科生,敢狮子大开口跟你要事业编制,难道你就不想想凭什么吗?”
“凭什么啊?”吴妍疑惑了一句,很快便反应过来,惊讶道:“噢~~~你是说……”
张曙光呵呵笑道:“你都上门去找人家了,只要不是太离谱的,你就先答应他嘛,有什么问题回头再讲。口头允诺,又不是打包票的,对不对?”
“嗯嗯嗯~老大,我知道错了。”吴妍连连点头,承认错误,“那我现在打电话给他?”
张曙光好笑的摇摇头,“回都回来了,急什么啊,还怕他跑了不成。好歹咱们也是江州一院,不能太让人小瞧了,先抻他两天再说。”
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不过见他不愿意说,她也没有强求,毕竟这是别人的看家本领,泄露出去有害无益。
随后两个人又谈了一下待遇问题,吴妍把之前对石磊说的话,跟周文又讲了一遍,最后笑问道:“你还有什么问题吗?”
周文想到了任务,说:“能不能问一下,我算是合同工还是正式工啊?”
“这个嘛……”吴妍迟疑了一下,她没想到周文会问这个问题。
现在生物生什么情况,她相信周文心里应该很清楚,江州市第一人民医院的合同,而且还那么优厚,别说他一个小小的本科生了,即使生物硕士生、博士生,很多人也是求之不得呢。
他居然还想一步登天,直接解决编制问题,真的有些过分了,她自己到现在还是合同工呢。
吴妍想了想说:“一般来说,如果是院里聘用的话,那肯定是正式工,但你这是检测中心PCR组的聘用合同,所以恐怕只能是合同工了。”
“合同工啊……”周文迟疑着。
其实合同工还是正式工,他真得无所谓,只要能让他到检测中心去实习实践,就算临时工他也愿意。
这不是任务要求在一个礼拜内成为正式工嘛,他不能不抻着点。
1000点经验值和1000点积分呢,还有一次开黑铁箱子的机会。
吴妍原本以为事情已经办妥了呢,没想到这里又节外生枝了,于是苦口婆心说:“你虽然是合同工,但是待遇是按照正式工来算的,并没有差在哪里。
另外嘛,什么事都是一步步来的,你先上班,编制问题等过一段时间再解决也不迟嘛。”
周文笑问道:“你是我学姐,而且也在医院上了一年班了,你说实话,我如果真签了合同工,编制大概什么时候能解决?”
“这个嘛……”吴妍有些尴尬,端起咖啡杯掩饰了一下。
等放下杯子后,吴妍说:“那这样吧,我帮你回去问问。但说实话,你不要抱太大期望。”
周文点点头,笑道:“行,那就麻烦学姐了。”
“不客气。”
周文那边还在离心呢,也没有多待,客气了几句便起身离开了。
……
回到实验室时,杨宇东和顾红云迫不及待的问他面试成功没有?
周文笑呵呵的说:“我提了个条件,她说要回去跟领导商量商量,等商量之后再给我准信。”
杨宇东无语道:“条件都那么优越了,你还要提条件啊?”
周文说:“我这不是看机会难得嘛,就想试试他们的底价。”
杨宇东:“……”
他真想用提取枪把周文脑浆抽出来一点,看他脑子里一天到晚到底在想些什么?
周文嘿嘿笑着去做PCR实验了。
PCR全称是PolymeraseChainReaction。
中文名是“聚合酶链式反应”,又称“聚酶链式反应”,是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。
能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段,于几小时内扩增至十万乃至百万倍。
其原理基本与人体细胞内DNA复制像似,但反应体系相对简单。
当然了,这不意味着PCR简单。
相反,PCR是非常难的.
首先通过高温“变性”,把一段双链结构的DNA解链,变成两条单链结构DNA。
之后“退火”,在低温下让“引物”和作为模板的DNA互补结合,形成局部双链。
最后中火“延伸”,通过DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链产生延伸反应,变成两条双链结构的DNA。
接下来不断重复这个过程。
1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……
通过PCR技术,可以从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。
比如亲子鉴定;
比如疫苗研究;
比如病毒疾病防治;
又或者遗传病研究等等,都需要大量用到PCR。
当然,周文今天做的水稻蚜虫生化试剂实验,其实是没有必要做PCR的。
蚜虫是一种很低级的虫子,一般直接用药物作用在其身上,然后看它的遗传特性就行了。
之所以还要做PCR,更多的目的也是为了学习PCR。
PCR反应体系包含了水、缓冲液、DNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)、引物P1/P2/DNA模板以及TAQ酶。
等一切都准备好之后,周文调节好提取枪的量程,然后提取30μl的水到三组PCR管里。
吸液的时候严格按照操作规程,垂直吸液、慢吸慢放。
换过枪头后,提取了5毫升的缓冲液到PCR管中。
再分别向管中加入DNTP/P1/P2/DNA模板……
得益于这段时间的学习,除了一开始有些紧张外,周文做起来有条不紊。
等所需原料添加完毕后,接下来就是离心了。
按照要求设定好转速后,等了三分钟,离心完成。
周文从离心机里取出装着混合液的PCR管,立刻放到了PCR仪上,进行扩增。
设定94℃预变性4min。
然后设定20次循环扩增阶段。
高温、低温、中温、高温……
1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……
周文焦急的等待着,心情就像产房外的丈夫一样,心里默默祈祷着“母子平安”,同时也在想,不知道等会生出来的是男是女?身体健康与否?
就在这时,周文突然想到系统积分可以加快实验进度,与其在这里傻等几个小时,要不加快看看?
反正这里也没有人看到。
想到这里,周文立刻召唤出个人属性页面,点击积分后,眼前弹出一个选项。
【请问是否消耗积分加快实验进度?是/否】
【是】。
【本次实验加快需要消耗20点积分,请再次确认】
周文见仅仅只要20点积分就能加快实验进度了,那还有什么好犹豫的,立刻选择了确认。
还不等周文反应过来,下一秒,PCR仪已经完成了扩增。
周文心里惊讶不已,系统的力量简直神秘莫测。
在心里感慨了一句,很快他又紧张了起来。
第一次做PCR,不知道能不能成功呢?
周文打开PCR仪,从里面取出PCR管。
本来下面是产物分析,不过周文有真视之眼,微微眯起眼睛,很快他便看到了高密度的双螺旋结构的DNA。
“perfect~”
要不是戴着口罩,周文就要哈哈大笑了起来。
学生物的有一个算一个,谁不是经过无数次失败后才学会做PCR的,有哪个人能像他一样,第一次做扩增,就一次性成功?
而且扩增效果出乎意料的好,简直完美。
……
江州市,第一人民医院,检测中心,PCR组。
吴妍在外面吃过午饭才回到医院,然后第一时间就到组长办公室汇报情况。
“人呢?”正在写实验报告的张曙光,头也不抬的问到。
吴妍有些不好意思的说:“那个……还没来。”
去的时候她可是拍着胸脯保证说,手到擒来的,结果牛皮吹炸了。
张曙光抬头意外道:“怎么,不愿意来?”
吴妍摇摇头说:“不是,只是他说……”
吴妍把周文的要求跟张曙光讲了一遍。
张曙光拿笔的左手,在办公桌上敲击着,面带微笑的说:“你说你,这么聪明的一个人,怎么关键时候掉链子啊?”
吴妍奇怪道:“我怎么掉链子啦?他要正式工待遇,这个我哪敢越俎代庖,替您答应啊?”
张曙光笑道:“越俎代庖怎么啦,他一个生物本科生,敢狮子大开口跟你要事业编制,难道你就不想想凭什么吗?”
“凭什么啊?”吴妍疑惑了一句,很快便反应过来,惊讶道:“噢~~~你是说……”
张曙光呵呵笑道:“你都上门去找人家了,只要不是太离谱的,你就先答应他嘛,有什么问题回头再讲。口头允诺,又不是打包票的,对不对?”
“嗯嗯嗯~老大,我知道错了。”吴妍连连点头,承认错误,“那我现在打电话给他?”
张曙光好笑的摇摇头,“回都回来了,急什么啊,还怕他跑了不成。好歹咱们也是江州一院,不能太让人小瞧了,先抻他两天再说。”
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